28
May
10

Teknik isolasi DNA dari saliva

Praktis, dan tidak serumit atau semahal yang dibayangkan. Pertama siapkan purified 20 ul kemudian ditambah sampel 500 ul. Digoyang/dikocok lembut dan penuh perasaan sebentar 3-5 kali, diamkan dalam es 10 menit. Setelah itu di centrifuge 1300 rpm 5 menit. Tampak pelet menjedal di eppendrof. Ambil supernatan ditambah ethanol 96% 500 ul.
Subhanallah, ketika dikocok sudah tampak benang2x halus DNA, kadang tidak tampak, bisa langsung menempel pada dinding eppendrof. Diamkan 5 menit, centrifuge 13000rpm , 5 menit. Buang supernatan, karena DNA sudah menempel di dinding eppendrof. Supaya dapat disimpan dalam waktu lama, larutkan dalam air 200 ul, dan shake selama 1 jam (pakai shaker ya, jangan tangan…)kemudian siap dibaca konsentrasinya. Jika akan disimpan, simpan dalam lemari pendingin biasa, bukan freezer. Untuk PCR, dibutuhkan kadar 50 ng/ul, sehingga setelah dibaca konsentrasinya perlu diencerken jika berlebihan, atau jika kurang, bisa isolasi lagi.Untuk mengisolasi 24 tube saliva, dibutuhkan waktu kira-kira 1 jam 15 menit.
Alat pengukur konsentrasi DNA, namanya nanodrop, jadi cuma tetesan kecil pakai mikropipet 10 ul diteteskan ditempatnya, kemudian langsung terbaca berapa konsentrasinya..
Nah…simple ya, selamat mencoba.


4 Responses to “Teknik isolasi DNA dari saliva”


  1. 1 itsme
    May 28, 2010 at 10:34 am

    ibu bisa tes DNA ini banyak digunakan untuk apa selain untuk mencockkan keturunan?apakah bisa mendeteksi ttg suatu penyakit?matur nuwun

    • May 29, 2010 at 2:58 pm

      mendeteksi prognosis pasien terhadap suatu penyakit, mendeteksi munculnya ADR potensial,mengetahui treatment yang tepat untuk pasien.ilmu sudah berkembang ke arah ini sekarang, luar biasa ya, …inilah dunia, kita jangan hanya terperangkap di satu sisi saja.sukses

  2. 3 nita
    May 30, 2010 at 4:48 pm

    ibu untuk sampel selain saliva apa lagi yg bisa digunakan?dan untuk nanodrop d jogja sudah adakah bu??
    nuwun bu,,,,

    • June 1, 2010 at 10:14 pm

      darah bisa, kemudian darah kering seperti kalau tes gula darah yang bayar 10ribuan itu, nanodrop saya gak survey di jogja ada atau gak, tapi alat pembaca konsentrasi ini khusus untuk membaca konsentrasi DNA, setahu saya di UGM, masih pakai spektrofoto yan apa itu ya….Ini yang ditetteskan ke alat cuma 2 mikroliter, tidak perlu 1.5 cc seperti biasanya kalau pakai spektro itu


Leave a Reply

Fill in your details below or click an icon to log in:

WordPress.com Logo

You are commenting using your WordPress.com account. Log Out / Change )

Twitter picture

You are commenting using your Twitter account. Log Out / Change )

Facebook photo

You are commenting using your Facebook account. Log Out / Change )

Google+ photo

You are commenting using your Google+ account. Log Out / Change )

Connecting to %s


%d bloggers like this: